Nell'ambito dei modelli alternativi alla sperimentazione animale, l'uso di colture cellulari primarie di origine suina rappresenta un valido modello di studio per scopi traslazionali. Le cellule impiegate nello studio sono state isolate da aorta toracica di suini ibridi commerciali macellati per uso alimentare, nel pieno rispetto del principio delle 3R a tutela degli animali utilizzati nella sperimentazione scientifica. A tutt’oggi, numerosi studi in vitro e in vivo dimostrano gli effetti antiossidanti e anti-infiammatori di sostanze di origine vegetale. Il progetto mira a testare in vitro l'efficacia di alcuni fitoestratti (estratti dalle foglie e frutto di mirtillo) nel contrastare il danno vascolare inducendo l'insulto tramite ipossia-riossigenazione, utilizzando cellule primarie suine (endoteliali e staminali mesenchimali) in coltura e co-coltura. Per fornire un modello di studio più predittivo, verranno testati modelli 3D basati su sferoidi e biomatrici vegetali, già riportati come scaffold impiantabili e biocompatibili.
presso il Servizio di Bioscienze e Biotecnologie (BSBT) del DIMEVET
presso il Dipartimento di Scienze per la Qualità della Vita (QUVI, UNIBO)
Caratterizzazione biochimica dei fitoestratti. Mantenimento ed espansione di cellule primarie di endoteliali e staminali mesenchimali. Messa a punto dei modelli di coltura 2D e 3D. Esperimenti per la definizione delle concentrazioni di fitocomposti (attraverso saggi di: saggi di citotossicità, studio del ciclo cellulare, studio metabolismo cellulare) per definire la dose da utilizzare. Valutazione della capacità protettiva dei fitoestratti sulle cellule esposte alla condizione ipossica (analisi dei ROS in spettrometria, espressione di enzimi antiossidanti tramite Western Blot e ELISA ed espressione genica, integrità della barriera tramite misura della TEER, attivazione endoteliale tramite test di adesione dei monociti).
Studio della letteratura e stesura di una review.